آزمایش اُ نیتروفنیل بتا د گالاکتو-پیرانوزید (ONPG)

آنزیم بتا گالاکتوزیداز تخمیر لاکتوز را کاتالیز می‌کند. باکتری‌هایی که لاکتوز را به ‌طور سریع تخمیر می کنند، دارای آنزیم پرمه آزی هستند که موجب تسریع واکنش و ایجاد کلنی صورتی رنگ در سطح مک کانکی آگار می شود. تخمیر آهسته ی لاکتوز توسط بتا گالاکتوزیداز طی ۲ تا ۱۰ روز مشخص می‌شود. تست سریع ONPG در مدت زمان ۴ ساعت، تخمیر لاکتوز را توسط بتا گالاکتوزیداز نشان می‌دهد. در این تست، آنزیم بتا گالاکتوزیداز سوبسترای ONPG را به اُ نیتروفنیل (ترکیب زرد رنگ) و گالاکتوز تجزیه می کند. ایجاد رنگ زرد (لوله آزمایش سمت راست) نشان دهنده ی مثبت بودن آزمایش است. نتیجه آزمایش در سمت چپ نشان می دهد باکتری قادر به تخمیر لاکتوز نیست.